“乡村振兴  精准扶贫——2018年扶贫攻坚暨产业兴旺发展论坛”6月29日至6月30日在海口举行，论坛由海口市人民政府、人民网、海南省农业厅、海南省科技厅共同指导，人民网海南频道、人民网舆情数据中心联合主办。

　　南方医科大学药学院院长刘叔文在论坛上发表题为《石斛碱抗流感及抗炎的活性及作用机制》主旨演讲。

　　刘叔文演讲中说，跟石斛有缘，两年前就来参观过海口火山石斛园。今天带着两年的研究成果过来和大家汇报。

　　什么是石斛碱？

　　一旦讲到咳嗽、发烧、头痛等等，我们首先会想到是不是流感了？其实世界上发生过很多大型的流感，从1918年西班牙的流感死亡5千万到1亿人，最近2009年墨西哥流感至少死亡1.8万人。

　　流感的波及范围广，发病率、死亡率高。最近禽流感病毒非常厉害，特别是H5N1已经打破了禽流感病毒不会传染人的概念。还有和最近的H7N9 ，2017年就感染了192例，死亡率非常高。如何防治流感？大家想的是用疫苗，但是去年的疫苗不一定能够治疗今年的流感，及时性有问题，有效性不是很高，所以适用性不是很广，所以现在要研究通用性的疫苗。

　　如果疫苗不行，有没有药物治疗和预防？有三种：M2质子通道抑制剂、神经氨酸酶抑制剂和最新的聚合酶抑制剂。有些药物现在存在副作用和毒性，对新型的流感病毒不一定有疗效，所以我们想研究新型抗流感病毒的药物。

　　石斛是药食同源的，时病论里面就有复方石斛汤，它润肺、清热，我们想它是不是能抗流感病毒？金钗石斛是进入药典的，生物碱的含量非常高，我做抗病毒药物做单体药物，看看石斛碱有没有抗病毒药物。说是金钗石斛的生物碱含量最高，我不大相信，我把市场上买到的石斛做了一下测试，确认它的石斛碱含量最高，0.39%，和药典差不多，我直接买了贵州的石斛测了，听说海口的石斛碱是0.6%。

　　它到底有没有抗病毒的活性？有活性这是其中一方面，首先它不要有毒性，我们用了500微克的浓度，毒性很小很小。它有没有活性呢？这是有病毒的，有病毒之后细胞全部都死掉了，我们加了药之后就和没有加病毒的相比较，它有很好的活性，50微克的一点半点都没有了，说明它的活性很高。流感病毒有17种H和9种N，加在一起有很多种组合，对很多都有效。绿点点表示的是流感病毒，我们要到50微克基本看不到绿点点了，可以看出它的效用，蛋白也可以看得出来，浓度越高，活性就越强。这也是一样，我们用了不同的手段在不同的细胞，A549是人的细胞，浓度越高，绿点点越少，代表它的活性越好。

　　石斛碱具有抗流感病毒活性

　　它为什么有这个活性？作用在哪个位置上？下面我们就做它的机制研究。流感病毒的感染先进我们的细胞，在细胞里复制，把病毒颗粒释放出来，完成它的整个生活周期。到底是作用在进入阶段、复制阶段、释放阶段？我们下面就研究。首先看看它是不是影响进入，我们用了一个假病毒的试验证明它是不影响进入的。我们看看它是不是影响病毒的释放，用了神经氨酸酶进行试验，影响它的活性的释放，我们发现它都没有任何活性，而对照达菲就有很好的药性，不影响它的释放，只影响复制。我们使用了提前给药、同时给药、事后给药的手段，发现它作用在复制的前期。

　　病毒的复制一般要8个小时，我们看它在第0到4个小时的效果是最好的，如果你同时给药，0到8小时给药也是有效的，所以我们认为它作用在复制的前期。总结一下，它是作用在复制的前期，不让它复制出来，作用在打叉叉的地方，石斛碱让它在核里不能复制，最后病毒就不能产生，是这样的一个作用机制。

　　它具体作用在哪个蛋白？靶点在哪里？我们认为它对核糖体起了重要的作用，核糖体包括很多蛋白，还有NP蛋白。我们做了很多研究，发现只作用NP上面，可以抑制核糖体的活性，抑制核蛋白出核。这是核蛋白的晶体结构，到底我们的小分子会接合在什么地方，黄色的就是我们的药物石斛碱，石斛碱到底接合在什么地方？我们用了一些药物辅助设计软件去docking，看看它定位在哪个位置，定位在黄色的区域，267、270、338、339氨基酸正好形成一个空穴，落在空穴里。这四个位置的氨基酸保守性都是99，这是什么意思呢？我们知道流感病毒有很多种，我们把它的序列进行比对，比对之后就发现有一些氨基酸根本不变，一变流感就没有活性了，不能复制，这种我们叫做保守型氨基酸，这种保守型氨基酸意味着这个药物可能对所有的流感病毒有效。如果我们把这些位点脱变掉，它的蛋白活性就变了，流感的复制也就停止了。非常关键的氨基酸就这几个。

　　总结下来，石斛碱抗流感的作用靶点为NP蛋白。它的位点是NP蛋白的保守功能位点，突变之后不能有复制，是非常保守的。它是通过与NP蛋白的结合抑制出核以及寡聚化，从而阻碍流感病毒的复制。

　　石斛碱抗炎的活性及作用机制

　　最后讲讲它的抗炎作用。我们知道流感感染人体最后很大的情况是炎症，重要的炎症会导致细胞因子风暴，进而引起多器官衰竭。如果能抑制细胞因子的产生，就具有抗炎作用。我们加了石斛碱，它的含量都会下降，在A549肺细胞里面是这样，在THP-1细胞中的下降作用更明显，所以石斛碱具有抗炎作用。一方面石斛碱直接抗病毒，又具有抗炎的效果，这样就在抗流感方面有独特的优势。

　　它为什么具有抑制细胞因子的释放作用？我们做了一些机制，这太科学了，不再赘述。

　　结论就是，这是流感病毒，它要进入我们的感染细胞，先在细胞浆里，石斛碱跟着细胞浆，它会进入细胞将和NP蛋白结合，结合之后病毒RNA就不能实现寡聚化，就不能进一步复制，复制出来的DNA也不能出核（出核之后它才能和新蛋白组合成新的病毒颗粒，这一步它就完成不了），病毒的复制就会停止，流感病毒就被治愈。石斛碱打破了寡聚化的过程和不让它出细胞核的过程。

　　刘叔文最后说到，研究论文发在农业与食品化学杂志，还申请一个专利，保护了知识产权，说明石斛碱是可以抗流感的。